(1)輸卵管堵塞。
(2)子宮內(nèi)膜異位伴盆腔內(nèi)粘連或輸卵管異常,使精子在盆腔內(nèi)被巨嗜細胞吞噬。
(3)男性輕度少精、弱精癥。
(4)免疫性不育、抗精子抗體陽性。
(5)原因不明的不育。
控制性超排卵與卵泡監(jiān)測 按自然周期取卵,一次周期只能得到一個卵。為了提高妊娠
率,目前在IVF-ET技術(shù)中,多采用控制性超排卵法,即選用人類促性腺激素,增強與改善卵巢功能,使一次周期能有多個卵泡發(fā)育,回收多個卵供受精。以獲得較多供移植的胚胎。但促超排卵法有時會有卵泡早熟、質(zhì)量差的情況。1991年,中山醫(yī)大第一附屬醫(yī)院用下丘腦促性腺激素激動劑(GnRH-a)的噴鼻劑Buserelin進行降調(diào)節(jié),聯(lián)合應(yīng)用促性腺激素,使優(yōu)勢卵泡數(shù)明顯增加 [3] 。在實施促超排卵過程中,須用陰道B超掃描監(jiān)測卵泡發(fā)育數(shù)目、大小,同時監(jiān)測尿LH及血內(nèi)激素變化,以便適時調(diào)整用藥、正確估算取卵時間,并盡量使黃體與內(nèi)膜功能、妊娠發(fā)生及妊娠維持相適應(yīng)。
取卵 我院用B超引導經(jīng)陰道穿刺取卵術(shù)取卵。此法不需麻醉切口,也不經(jīng)過膀胱,避免了尿液對精子的傷害,優(yōu)于用腹腔鏡或B超引導經(jīng)腹取卵的方法。
體外授精 將取到的卵泡液注入培養(yǎng)皿,肉眼快速辨認含卵細胞及其外周的透明帶、放射冠的卵冠丘復合物。在解剖鏡下確認有卵細胞存在后,置入CO 2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)4~8h,再根據(jù)復合物的形態(tài)變化判斷選擇成熟卵細胞,按每卵配10~20萬個精子的比例,投入經(jīng)過洗滌優(yōu)選已誘導獲能的精子,授精后16~18h觀察情況,將受精卵移入培養(yǎng)試管/皿內(nèi)培養(yǎng)。
胚胎移植 于取卵后48h,胚胎發(fā)育成2~8個細胞階段或在取卵后72h胚胎發(fā)育至8~16個細胞時植入子宮。后者較符合自然受精胚胎進入子宮的時間,且在傳統(tǒng)體外培養(yǎng)條件下,只有最健康的胚胎才能活到3天,故移植成功率高。有報道,應(yīng)用共培養(yǎng)術(shù),可使胚胎培養(yǎng)至囊胚期再移植,妊娠率高達50% 。一次移植的胚胎數(shù)以2~3枚為宜。因為增加胚胎移植數(shù),妊娠率雖呈不按比例的增加,但多胎率也會隨之增加,經(jīng)對幾組移植1~6胎資料的比較 ,其中以移植3個胚胎的妊娠率相對較高,而多胎率相對較低。
胚胎凍融 不僅AID治療的精子需要凍融,在IVF-ET中由于促超排卵的應(yīng)用,一次周期回收的卵泡,經(jīng)受精發(fā)育的胚胎,移植后會有剩余也需要冷凍儲存,如移植失敗,就可在下個自然周期或HRT周期移植,以提高一次取卵的妊娠率。另外遇到患者因促超排卵引發(fā)的卵巢刺激綜合征,為了防止妊娠加重病情,也可將胚胎凍存,留待以后移植用。胚胎凍存的機制是,超低溫可抑制細胞的新陳代謝,使生命進入休眠狀態(tài)而保存下來。保存溫度為 -196℃,保存裝置為以液氮作致冷源的液氮罐,但在胚胎的冷凍和升溫復蘇過程中,當經(jīng)過0℃~60℃這一溫區(qū)時,如降溫過快,細胞內(nèi)液中的水分又會很快結(jié)冰,因為體積膨脹而漲破細胞膜,造成細胞死亡;如降溫過慢,細胞外液中的水分會先結(jié)成細小冰晶,使外液的滲透壓升高,導致細胞內(nèi)液中的水分向外滲透,溶質(zhì)濃度相對升高,從而引起細胞蛋白質(zhì)的分解變性,細胞一樣難逃死亡厄運。因此在胚胎的凍融中,必須選擇合適的降溫與升溫速度,并借助于某些具有既能減少細胞內(nèi)的冰晶形成,又能延緩細胞外液中溶質(zhì)濃
度升高的冷凍保護劑的作用,才能使胚胎安全地實現(xiàn)凍存或復蘇。目前常采用的方法是慢速凍快速復溫法。精子凍藏的機制和凍融的原理一如上述。
胚胎移植后監(jiān)測 移植后14天驗晨尿HCG陽性為生化妊娠,顯示胚胎植入和發(fā)育正常。移植4~6周腹部B超查到胎囊、胚胎和心管搏動為臨床妊娠。
胚胎移植合并癥 主要有流產(chǎn)、宮外孕、多胎妊娠、卵巢過度刺激綜合征(OHSS)。
妊娠率 目前為25%~35%。隨著對影響妊娠成功因素的深入研究和相應(yīng)技術(shù)環(huán)節(jié)的改進,預期IVF-ET妊娠率還會提高。