dna聚合酶是可以復(fù)制細胞DNA的一種重要作用酶。那dna聚合酶有什么功能呢?dna聚合酶的分類又有哪些呢?相信有許多人都是不知道的,不過沒關(guān)系,今天小編就來為大家一一解答一下。想知道的朋友不妨就來看一下吧。
dna聚合酶有哪些功能呢?對于很多人來說,dna聚合酶是陌生的。所以也不會知道dna聚合酶的功能。既然不知道,那下面小編就來為大家解答一下吧。
一、聚合作用
在引物RNA'-OH末端,以dNTP為底物,按模板DNA上的指令由DNApolⅠ逐個將核苷酸加上去,就是DNApolⅠ的聚合作用。
酶的專一性主要表現(xiàn)為新進入的脫氧核苷酸必須與模板DNA配對時才有催化作用。dNTP進入結(jié)合位點后,可能使酶的構(gòu)象發(fā)生變化,促進3'-OH與5'-PO4結(jié)合生成磷酸二酯鍵。
如果是錯誤的核苷酸進入結(jié)合位點的話,則是不能與模版配對的,因此也無法改變酶的構(gòu)象而被3'-5'外切酶活性位點所識別并切除之。
二、3'→5'外切酶活性──校對作用
這種酶活性的主要功能是從3'→5'方向識別和切除不配對的DNA生長鏈末端的核苷酸。當(dāng)反應(yīng)體系中沒有反應(yīng)底物dNTP時,由于沒有聚合作用而出現(xiàn)暫時的游離現(xiàn)象,從而被3'→5'外切酶活性所降解。
如果提高反應(yīng)體系的溫度可以促進這種作用,這表明溫度升高使DNA生長鏈3'末端與模板發(fā)生分離的機會更多,因而降解作用加強。
當(dāng)向反應(yīng)體系加入dNTP,而且只加放與模板互補的上述核苷酸才會使這種外切酶活性受到抑制,并繼續(xù)進行DNA的合成。
由以上結(jié)論可退出,3'-5'外切酶活性的主要功能就是校隊作用,并且當(dāng)加入核苷酸與模版不互補而游離時,則是會被3'-5'外切酶切除,以便重新在這個位置上聚合對應(yīng)的核苷酸。
在某些T4噬菌體突變株中DNA復(fù)制的真實性降低,而易發(fā)生突變,從此突變株分離得到的T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性很低。
相反,另外一些具有抗突變能力的T4突變株中的T4DNA聚合酶的3'→5'外切酶活性比野生型高得多,因此,其DNA復(fù)制真實性好,變異率低??梢?,3'→5'外切酶活性對DNA復(fù)制真實性的維持是十分重要的。
三、5'→3'外切酶活性──切除修復(fù)作用
5'→3'外切酶活性就是從5'→3'方向水解DNA生長鏈前方的DNA鏈,主要產(chǎn)生5'-脫氧核苷酸。這種酶活性只對DNA上配對部分(雙鏈)磷酸二酯鍵有切割活力作用,方向是5'→3'。
每次能切除10個核苷酸,而且DNA的聚合作用能刺激5'→3'外切酶活力達10倍以上。因此,這種酶活性在DNA損傷的修復(fù)中可能起著重要作用。對岡崎片段5'末端RNA引物的去除依賴此種外切酶活性。