2、對(duì)小白鼠晚期移植肝癌腹水型治療作用
選擇18-22g小鼠皮下注射瘤細(xì)胞懸液(1:1),24小時(shí)稱重隨機(jī)分組,間隔6日腹水已長(zhǎng)成,稱重后治療組皮下注射天花粉0.2ml/只,間隔4日稱重后皮下注射天花粉0.4或0.2ml/只,對(duì)照組皮下注射生理鹽水0.2m1/只,間隔時(shí)間同治療組。結(jié)果天花粉注射1次后腹水量明顯減少,腹水抑制率達(dá)73%(P<0.05)
3、對(duì)小白鼠肝癌實(shí)體瘤型的治療作用
實(shí)驗(yàn)方法同上,結(jié)果顯示天花粉對(duì)小白鼠肝癌實(shí)體瘤抑制率可達(dá)36-38.9%,治療組瘤體明顯小于對(duì)照組(P<0.05)。
4、結(jié)晶天花粉蛋白對(duì)體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞的抑制作用
Jar細(xì)胞培養(yǎng)于含10胎牛血清的RPMI1640人工培養(yǎng)液,加有青鏈霉素各100ug/ml。
Hela和Fib細(xì)胞用DMEM培液,其中胎牛血清和青、鏈霉素含量同前。以上3種細(xì)胞均呈單層貼壁生長(zhǎng)。按文獻(xiàn)37方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,結(jié)晶天花粉蛋白對(duì)Jar人絨癌細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用,培育48小時(shí)后的皮內(nèi)注射50為3.3ug/ml,而Hela人宮頸癌細(xì)胞和正常纖維細(xì)胞的皮內(nèi)注射50分別為13.0和16.0ug/ml。此外,結(jié)晶天花粉蛋白對(duì)Jar細(xì)胞的hCG分泌顯示更強(qiáng)的抑制作用,培養(yǎng)48小時(shí)后,抑制50%,hCG分泌的結(jié)晶天花粉濃度為1.3ug/ml。
三、對(duì)免疫功能的影響
1、天花粉對(duì)荷瘤小鼠紅細(xì)胞免疫功能的影響
健康昆明種雄性小鼠,2-3月齡,體重21.3±4.6g,天花粉組和腫瘤小組小鼠腹腔接種細(xì)胞癌細(xì)胞懸液,正常組皮下注射等體積生理鹽水。
天花粉組于接種24小時(shí)后皮下注射天花粉0.2ml(0.2mg)。其他組給予等體積生理鹽水。各組動(dòng)物于接種腫瘤后ll日分別摘眼球取血,RCIA紅細(xì)胞完全結(jié)上一個(gè)以上酵母細(xì)胞為一花結(jié),CIC以1:8稀釋度出現(xiàn)(++)為陽性。
天花粉組與正常組小鼠的紅細(xì)胞C3b受體花結(jié)(RBC-RR)在同一水平,腫瘤組明顯降低,其差異非常顯著(P<0.01),表明荷瘤小鼠紅細(xì)胞C3b受體活性明顯受損,經(jīng)天花粉治療后,可使其恢復(fù)至正常水平,天花粉組小鼠紅細(xì)胞免疫復(fù)合物花結(jié)(RBC-ICR)增高,與其他兩組均有顯著差異(P<0.01),提示天花粉可增強(qiáng)荷瘤小鼠紅細(xì)胞粘附免疫復(fù)合物的能力。
這一結(jié)果與CIC測(cè)定相一致。并與文獻(xiàn)報(bào)道互為印證。
2、天花對(duì)小鼠唾液腺內(nèi)凝集素受體和免疫球蛋白的影響
動(dòng)物為20只成年雄性健康ICR純系小鼠,體重18-22g,分為2組,每組10只,第1組為天花粉組,每日1gl次,每次0.5ml(濃度65mg/ml),共7日,藥液的制備用常規(guī)水提法進(jìn)行,第2組為對(duì)照組,每日皮下注射l次,每次0.5ml生理鹽水。
8日,殺死小鼠,取其唾液腺,分別作HE和其它染色。
結(jié)果表明,小鼠頜下腺內(nèi)PNA,PBA受體顯著增加,IgG明顯增多、酸性粘多糖也高于對(duì)照組,提示天花粉與促進(jìn)唾液腺內(nèi)半乳糖和乙胺半乳糖的合成以及增加機(jī)體免疫功能有關(guān)。
四、抗菌及抗病毒作用
天花粉煎劑在體外對(duì)溶血性鏈球菌、肺炎雙球菌、白喉?xiàng)U菌有一定的抑制作用,對(duì)傷寒桿菌、綠膿桿菌、痢疾桿菌、變形桿菌及金黃色葡萄球菌的作用均較弱。
采用病變抑制法和125I放射免疫法在3種細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)上測(cè)定了天花粉蛋白對(duì)7種病毒的抑制作用。
結(jié)果表明,天花粉蛋白濃度在10ug/ml以下時(shí),對(duì)細(xì)胞無明顯的毒性作用,在0.001-10ug/ml時(shí)對(duì)乙型腦炎、柯薩奇B2、麻疹、腺病毒3型單純皰疹病毒I型、水泡性口炎病毒及乙型肝炎病毒等均有明顯的抑制作用,并且這種抑制作用隨天粉蛋白的濃度增大而提高。
濃度在0.01ug/ml時(shí)可以抑制由100TC皮內(nèi)注射50病毒引起細(xì)胞病變的50%、提示,天花粉可能是繼干擾素之后另一種具有廣譜抗毒作用的蛋白質(zhì)。
五、抗艾滋病病毒
體外實(shí)驗(yàn)表明,天花粉蛋白可抑制艾滋病病毒(HIV)在感染的免疫細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制,減少免疫細(xì)胞中受病毒感染的活細(xì)胞數(shù),其有效抑制濃度為0.05-10ug/ml。
一種能抑制HIV感染和復(fù)制的蛋質(zhì)稱為抗-HIVTA29。臨床資料亦表明有一定的治療效果。